Système d'imagerie par fluorescence In Vivo
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Applications
Tumor Imaging
Une lignée cellulaire stable GFP peut être utilisée pour confirmer la tumeur. La lignée cellulaire stable GFP créée peut être imagée in vitro en utilisant FOBI. Les cellules GFP sont injectées dans les tissus sous-cutanés et les images de fluorescence en tant que prolifération cellulaire. De cette manière, on peut obtenir des images de métastases vers d'autres tissus, en plus de quantifier et de comparer la taille de la tumeur.
Au fil du temps, la force du signal de fluorescence change et le temps d'exposition de la caméra peut varier en conséquence. Le programme d'analyse NEOimage peut quantifier ce changement en tenant compte de différentes conditions telles que le temps d'exposition et le gain; les résultats d'échantillons avec des images différentes peuvent également être comparés et analysés.
Cell Tracking
Des cellules souches ou des cellules immunitaires avec des fonctions améliorées à des fins diverses peuvent être imagées chez l'animal afin de déterminer leur emplacement et leur viabilité. Les cellules souches et les cellules immunitaires sont difficiles à étiqueter avec des gènes fluorescents. Ainsi, les cellules peuvent être colorées avec des réactifs fluorescents de différentes manières.
Les cellules souches et les cellules immunitaires colorées avec un réactif fluorescent peuvent être introduites dans un animal en utilisant diverses méthodes telles que l'injection intraveineuse, l'injection intrapéritonéale et l'injection sous-cutanée. Ces cellules peuvent être localisées en utilisant l'imagerie FOBI. On peut déterminer la survie des cellules en utilisant une analyse quantitative.
Plant
FOBI peut imager des feuilles de plantes étiquetées GFP. Les feuilles des plantes sont difficiles à obtenir en raison de la forte autofluorescence de la chlorophylle. L'autofluorescence de la chlorophylle peut être éliminée et analysée avec de la GFP à l'aide d'un filtre spécifique.
L'autofluorescence de la chlorophylle elle-même peut également être utilisée comme données. Le degré d'activité de la chlorophylle peut être confirmé par l'intensité de l'autofluorescence. De plus, des images peuvent être obtenues à partir de graines de plantes et de callosités. L'imagerie par fluorescence est possible avec les plantes tout au long de leur cycle de vie.
DDS(Drug Delivery System)
Les médicaments ou cellules marqués par fluorescence peuvent déterminer l'intensité de la fluorescence in vitro. Ces données peuvent être utilisées pour confirmer si le marqueur fluorescent est bon ou non pour l'imagerie In Vivo. Cela peut être utilisé comme base pour prédire ou corriger les résultats des expériences In Vivo. Ce processus peut éviter les erreurs expérimentales. Dans certains cas, l'expérience in vitro peut être importante en soi.
Les médicaments confirmés in vitro peuvent être injectés à des animaux à des fins expérimentales. En prenant des images à certains intervalles, vous pouvez vérifier le mouvement et le schéma d'accumulation du médicament dans les tissus vivants de l'animal.
L'image du médicament confirmé In Vivo peut être vérifiée à nouveau Ex Vivo. Parce que la fluorescence est toujours exprimée même après le sacrifice de l'animal, il est possible de quantifier chaque tissu séparément. Les données Ex Vivo qui en résultent, ainsi que les données In Vivo, peuvent fournir d'excellentes preuves pour une expérience.
Fig. 1. Animal imaging by FOBI
It is possible to apply most fluorescence proteins and fluorescence materials from GFP to ICG using four channels of Blue, Green, Red and NIR. Since more than one fluorescent substance can be imaged, different functions can be observed in one sample. For example, tumor imaging and drug imaging can be performed in the same animal, so targeting and tumorization can be observed simultaneously. You can also merge bright images in order to localization the fluorescence within the animal.
Fig. 2. Fluorescence imaging of various materials and methods
a. Fluorescence labeled chemicals in the Zebrafish. b. GFP cell in the 24well plate. c. Fluorescence labeling test. d. Ex Vivo imaging for drug delivery system. e. GFP expression leaf infected gene by virus vehicle. f. Auto-fluorescence from the chlorophyll. g. Gene expression on the leaf with marker gene. h. Gene transfected seed seperated by GFP imaging.